研究报告/Research Report

马尾松RCA基因的克隆和序列分析  

潘婷 , 张逢凯 , 王晓锋 , 阮倩倩 , 刘靖 , 盛璐 , 季孔庶
林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室, 南京林业大学, 南京, 210037
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2015 年, 第 13 卷, 第 20 篇   doi: 10.13271/j.mpb.013.000391
收稿日期: 2014年05月20日    接受日期: 2014年06月11日    发表日期: 2014年10月17日
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摘要

1,5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶(RubisCO)活化酶(RCA)是体内活化光合作用限速酶—RubisCO的重要酶。本研究通过反转录PCR和cDNA末端快速扩增技术,从马尾松中分离得到了Pmrca1 (登录号KF420118)和Pmrca2 (登录号KF420119)两条RCA基因cDNA序列。两条序列均包含完整的编码区与5'端和3'非翻译区,长度分别为1 816 bp和1 953 bp,编码PmRCA1和PmRCA2两个蛋白,长度分别为480和440个氨基酸。序列分析发现两个蛋白质都具有RCA和AAA+蛋白家族(ATPase associated with various cellular activities)特异性结构域和定位于叶绿体的转运肽,PmRCA1还具有RCA大同工型特有的由两个半胱氨酸(Cys)残基组成的保守结构。多重序列比对显示,这两个蛋白质序列分别与红花槭的RCA大同工型和小同工型的相似性达到78%。将PmRCA1和PmRCA2与20种不同物种RCA构建进化树,发现其与地中海松属于同一分支。研究结果为进一步分析马尾松RCA的功能和光合作用机制奠定了基础。

关键词
马尾松;RCA;RACE;cDNA克隆;序列分析

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《分子植物育种》印刷版
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